食品・飲料業界向けの滴定/カールフィッシャー測定アプリケーションガイド

Mettler Toledo Balance Mini Catalogue 31 滴定と カールフィッシャー 測定法 選定された滴定アプリケーション 食品と飲料業界向け Food and Beverages

はじめに 　食品と飲料業界は食品の安全、消費者の保護と商業のために全製造工程が 規制されています。配合、微生物、異物混入などが規制対象になります。 　製造工程を管理するためには確立された測定法が必要です。滴定法での原 料または最終製品に含まれる特定成分の定量測定は、他の手法と合わせて幅 広く活用されています。定量法としての滴定測定は自動化が進んでおりサンプ ルの前処理、試薬の添加、結果計算とデータ保存を全自動で行えます。 　メトラー・トレドは滴定装置、サンプルチェンジャー、豊富なセンサの組 み合わせによりほとんどの滴定分析の要望に答えられます。食品や飲料の製 造現場から品質管理、研究開発に最適なメソッドのショートカット機能（One Click T M）、頑丈で品質が保証された装置、アクセサリやシステム化より予算と 要望に合致した装置を提供します。また、適切なトレーニングも EDUPacsに より提供します。オペレーショントレーニングに伴う各操作の詳細を資料とし て提供します。EDUPacsは装置のオペレーショントレーニングを標準化と文書 化します。 　メトラー・トレドの豊富な滴定メソッドは、長年の現場使用により実証され ています。これらのメソッドにより最適な測定法での精度の高い測定が可能に なります。このガイドでは食品と飲料分野に特化した滴定メソッドをご紹介し ます。化学分析マーケットサポートグループは、食品と飲料業界向けのアプリ ケーションガイド Vol.31を皆様に提供できることを誇りに思います。 　本ガイドが皆様の日常的な分析業務の貴重な情報源とサポート役になる事 を願っております。 マーケットサポート　マネージャー シニアアプリケーション化学者 Dr. Hans-Joachim Muhr Dr. Cosimo A. De Caro

項 目 No. アプリケーション 中和滴定（水溶液） M400 酢に含まれる酢酸の定量 M402 食油中の遊離脂肪酸の定量 M403 遊離脂肪酸測定試薬のブランク値 M487 AOAC939.05に準じたコーンフラワー中の脂肪酸化度 M494 自動サンプリングによるワインの pHと酸度測定 塩化物測定 M379 ワイン中の酸と塩化物の定量 M404 ケチャップ中の塩化物の定量 M486 微量の塩化物の定量 ビタミン C M411 オレンジジュース中のビタミン Cの定量：ボルタンメトリー滴定法 M412 オレンジジュース中のビタミン Cの定量：電流滴定法 二酸化硫黄 M419 ワイン中の遊離ニ酸化硫黄（SO2）の定量 M564 ワイン中の総二酸化硫黄（SO2）の定量 特性測定 M051 ウィイス法（AOACメソッド 993.20, 2012）によるヨウ素価：サンプルと戻り値 M618 食油と油脂のケン化価 M369 AOACメソッド 28.022　食油と油脂の過酸化物価 METTLER TOLEDO - 1 - Titration in Food & Beverages

No. アプリケーション ケルダール窒素含量 M454 ケルダール窒素　－　TTL/IO接続 その他アプリケーション M269 乳製品に含まれるカルシウム量　－　イオン電極 Cu-ISEを使った逆滴定法 M443 カリウムイオン電極（DX239-K+）の校正 M444 水に含まれるカリウム量　－　電位差直接法 M472 クエン酸量　－　銅イオン電極法 M476A 醤油中の亜硝酸塩の定量　－　FASでの逆滴定法 M485 食品のソルビン酸カリウム（E202）の定量 M488 乳脂測定　－　CAC/RM15-1969 M489 コンドロイチン硫酸ナトリウムの測定　－　USP法 水分含量（カールフィッシャー滴定法） M304 粉末乳の水分測定 M306 コーンスターチの水分測定　－　水分気化装置 DO308法 M394 黒砂糖の表面水分測定　－　外部抽出での電量カールフィッシャー法 M490 油の水分測定　－　高温 (40－ 50℃ )での電量カールフィッシャー法 M623 食油と油脂の水分測定 METTLER TOLEDO - 2 - Titration in Food & Beverages

食品と飲料業界での滴定測定 滴定法で測定するサンプルの種類は幅広く、それぞれの特性は大きく異な ります。適切な前処理とセンサを選択する必要があります。下表は代表的 なサンプルの滴定法を記載しています。 測定項目 サンプル 測定対象物 滴定法 センサ - ケチャップ - 乳製品 食塩の定量 - 野菜ジュース 塩化物としての食塩量 硝酸銀での沈殿滴定法 複合銀リング電極 - スナック菓子 - 香辛料、ソース - 食酢 - フルーツジュース - 野菜ジュース 酸度 - ワインソフトドリンク 総酸量 アルカリ滴定液による 中和滴定法 複合ガラス pH電極- - 牛乳 - 蜂蜜 - 食油と油脂 - 牛乳 豆乳 光度センサ- チーズ DP5Phototrode（色識カルシウムの定量 - ヨーグルト カルシウムイオン EDTAでの錯滴定法 別センサ）- カルシウムイオン電極 - ジュース クリーム 銅イオン電極- - フルーツジュース 複合プラチナリング ビタミン Cの定量 - 野菜ジュース ビタミン C 酸化還元滴定法 酸化還元電極または - ドライフルーツ 分極ダブルピン電極 - ワイン 遊離と - 炭酸飲料 複合プラチナリング 総ニ酸化硫黄 - フルーツ飲料 二酸化硫黄 ヨウ素での酸化還元滴 小麦粉 定法 ORP電極　または分極 - ダブルピン電極 - ドライフルーツ - 牛乳 - チーズ ケルダール窒素 - ヨーグルト アンモニウムイオン 酸性滴定液での中和滴 - バター 複合 pHガラス電極 NH4+ 定法 - 肉 - 野菜 - バター ヨウ素価 チオ硫酸ナトリウムで 複合プラチナ ORP電- マーガリン 総酸量 - 食油と油脂 の酸化還元滴定法 極 - バター ケン化価 - マーガリン アルカリ性物質 酸性滴定液での中和滴 定法 複合 pHガラス電極 - 食油と油脂 Rebelein法での - ワイン 還元糖の定量 ジュース 還元糖 チオ硫酸ナトリウムで 複合プラチナリング - の酸化還元滴定法 酸化還元電極 - 砂糖 カールフィッシャー - 小麦粉 ヨウ素での酸化還元滴 法での水分測定 - バター、チーズ 水分 定法 分極ダブルピン電極 - コーヒー - チョコレート METTLER TOLEDO - 3 - Titration in Food & Beverages

参考資料 選定された下記文献資料には、食品と飲料サンプルの滴定測定に関する詳 細情報が記載されています。 [1] AOAC International - Association of Official Analytical Chemists, www.aoac.org [2] IDF - International Dairy Federation, www.fil-idf.org [3] ISO - International Organization for Standardization, www.iso.org [4] FAO – Food and Agriculture Organization www.fao.org [5] EFSA – European Food Safety Authority www.efsa.europa.eu [6] Swiss Food Manual (Schweizerisches Lebensmittelbuch, SLMB) www.slmb.bag.admin.ch [7] German Food Manual (Deutsches Lebensmittelbuch) www.bmelv.de/EN/ [8] FDA – US Food and Drug Administration, www.fda.gov [9] FSA - Food Standard Agency, UK www.food.gov.uk METTLER TOLEDO - 4 - Titration in Food & Beverages

METTLER TOLEDO 　　　　　　　　　　　　　Application M400-2009 酢に含まれる酢酸の定量 水酸化ナトリウムでの滴定 サンプル 食酢　0.7～ 1g サンプル前処理と測定方法 注意： 対象物質 酢酸、　CH COOH 本メソッドは、全自動測定が可能です。3 分子量（M）= 60.05g/mol, マニュアル設定にも簡単に変更できます。 装置の滴定スタンドメニューでマニュアル 当量数（z） = 1 スタンドを選定して下さい。 1）DG115-SC pHガラス電極の校正：測定 試薬 50ml　イオン交換水 　 前に pH電極を pH標準液 4.01、7.00と 　 9.21で校正する。 2）滴定液水酸化ナトリウムの力価は標準物 滴定液 水酸化ナトリウム、NaOH 　 質フタル酸水素カリウム（KHP）80mg 濃度（NaOH）=　0.1mol/L 　 を 50mlイオン交換水に溶解し、これを 　 滴定して求める。 3）測定ビーカーには 1g食酢と 50mlのイ 標準物質 フタル酸水素カリウム 　 オン交換水を入れる。 KHP　80mg 4）自動滴定装置 T50 / T70 / T 90は、ダイア 　 フラムポンプを追加したサンプルチェン センサ DG115-SC 　 ジャーロンドリーノで連続測定が可能。 　 電極洗浄時間を 2秒に設定し、次の測定 　 前に電極をイオン交換水で洗浄する。 化学反応 CH3COOH + NaOH → CH3COONa + H2O 計算式 質量濃度（w/w）としての 注意点 含量（%） 1）このメソッドは、食酢に最適な条件に設 R1 = Q*C/m, 　 定されています。 C = M/(10*z) 2）食酢の種類によっては条件を変更する必 　 要があります。 廃棄処理 中和し、水溶液として廃棄す る 作者 Thomas Hitz, MSG, July 2006 Ralph Egli, MSG, May 2009 METTLER TOLEDO Page 1 of 6 Titration Application M400-2009

測定装置 - 自動滴定装置　T50/T70/T90、コンパクト滴定装置 G20 - 分析天びん　XS205 - サンプルチェンジャーロンドリーノ、ダイアフラムポンプと洗浄ユニット追加 Instruments - T50/T70/T90 Titration Excellence, G20 Compact Titrator (with small changes). - XS205 Balance アクセサリ - 10ml -ビRュonレdolッinoト SaDmVp1le0 C1h0an×ger1w個ith diaphragm pump and PowerShower™ - 滴定ビーカー ME-101974 Accessories - 1 x 10 mL DV1010 burette - プリン- タTitration beaker ME-101974 - Olivetti Printer JobJet 210 Results T50/T70/T90 Results T50/T70/T90 　　　 All results Method-ID M400 Sample Vinegar (1/1) R1 (Content) 4.713 % Sample Vinegar (1/2) R1 (Content) 4.734 % Sample Vinegar (1/3) R1 (Content) 4.718 % Sample Vinegar (1/4) R1 (Content) 4.717 % Sample Vinegar (1/5) R1 (Content) 4.722 % Sample Vinegar (1/6) R1 (Content) 4.724 % Statistics Method-ID M400 R1 Content Samples 6 Mean 4.738 % s 0.007 % srel 0.152 % TitratioTni tcruartvioen T c5u0r/vTe7T05/0T/9T070/T90 METTLMEERT TTLEORL TEODLEOD O PagPea g2e 2ooff 66 Titration AppTlitircataiotni oAnpp lMica4tio0n0M-42000-200099

Table of measured values T50/T70/T90 　　　 コメント T50/T70/T90 -- METTLER TOLEDO Page 3 of 6 Titration Application M400-2009

ReRseuslutsl tGs 2G020 All results Method-ID M400 Sample Vinegar (1/6) R1 (Content) 4.781 % Sample Vinegar (2/6) R1 (Content) 4.763 % Sample Vinegar (3/6) R1 (Content) 4.776 % Sample Vinegar (4/6) R1 (Content) 4.779 % Sample Vinegar (5/6) R1 (Content) 4.780 % Sample Vinegar (6/6) R1 (Content) 4.774 % Statistics Method-ID M400 R1 Content Samples 6 Mean 4.776 % s 0.007 % srel 0.139 % Titration curve G20 Not available Titration curve G20 Not available Table of measured values G20 Not available Table of measured values G20 Not available Comments G20 1. For the G20 Compact Titrator results, no automation was used. Each sample has been added コメンmaトnu Gall2y 0to the titration stand. コンパクト滴定装置 G20の測定ではサンプルチェンジャーは使用しなかった。 サンプルは毎回、手動で交換した。 METTLER TOLEDO Page 4 of 6 Titration Application M400-2009 METTLER TOLEDO Page 4 of 6 Titration Application M400-2009

Method T50/T70/T90 Method T50/T70/T90 001 Title 007 Record Type General titration Results Per series Compatible with T50 / T70 / T90 Raw results Per series ID M400 Table of meas. values Last titration function Title Acetic acid content in Sample data Per series vinegar Resource data No Author METTLER TOLEDO E - V Last titration function Date/Time 02.08.2006 15:00:00 dE/dV - V Last titration function Modified at -- log dE/dV - V No Modified by -- d2E/dV2 - V No Protect No BETA – V No SOP None E - t No V - t No 002 Sample dV/dt - t No Number of IDs 1 T – t No ID 1 Vinegar E – V & dE/dV – V No Entry type Weight V – t & dV/dt – t No Lower limit 0.7 g Method No Upper limit 1.0 g Series data No Density 1.0 g/mL Condition No Correction factor 1.0 Temperature 25.0°C 008 End of sample 003 Titration stand (Rondolino TTL) Type Rondolino TTL Titration stand Rondolino TTL 1 004 Stir Speed 35% Duration 10 s Condition No 005 Titration (EQP) [1] Titrant Titrant NaOH Concentration 0.1 mol/L Sensor Type pH Sensor DG115-SC Unit pH Temperature acquisition Temperature acquisition No Stir Speed 35% Predispense Mode Volume Volume 1 ml Wait time 5 s Control Control User Titrant addition Dynamic dE (set value) 12 mV dV (min) 0.005 mL dV (max) 0.5 mL Meas. val. acquisition Equilibrium controlled dE 0.5 mV dt 1 s t (min) 3 s t (max) 30 s Evaluation and recognition Procedure Standard Threshold 5 pH/mL Tendency Positive Ranges 0 Add. EQP criteria No Termination At Vmax 10.0 mL At potential No At slope No After number of recognized EQPs Yes Number of EQPs 1 Combined termination criteria No 006 Calculation R1 Result Content Result unit % Formula R1=Q*C/m Constant C M/(10*z) M M[Acetic acid] z z[Acetic acid] Decimal places 3 Result limits No Record statistics Yes Extra statistical func. No Send to buffer No Condition No METTLER TOLEDO Page 5 of 6 Titration Application M400-2009 METTLER TOLEDO Page 5 of 6 Titration Application M400-2009

MeMtehtohdo dG 2G02 0C oCmopmapcatc tT iTtirtartaotror 001 0T0i1t lTeitle 007 0R0e7c oRredcord TypeType GeneGreanle rtailt rtaitiroantion SummSaurmymary No No CompCaotmipbaltei bwliet hwith G20G20 ResuRletssults Per Pseerr isesries ID ID M400M400 Raw Rraews urletssults Per Pseerr isesries TitlTeitle AcetAicce tAici dA cind Viinn eVgianregar TablTea bolfe moefa sm.e avsa.l uveaslues LastL atsitt rtaitiroant ifounn cftuinocntion AuthAourthor AdmiAndimsitnriastorrator SampSlaem pdlaet adata Per Pseerr isesries DateD/aTtiem/eTime 02.082.20080.92 0 0195 : 0105:00:00 ResoRuerscoeu rdcaet adata No No ModiMfoideidf iaetd at -- -- E -EV- V LastL atsitt rtaitiroant ifounn cftuinocntion ModiMfoideidf ibeyd by -- -- dE/dVE/-dVV- V LastL atsitt rtaitiroant ifounn cftuinocntion ProtPercotect No No log ldoEg/ dVE /-dVV - V No No SOPSOP NoneNone d2E/dd2VE2/d-V2V- V No No BETABE–TAV– V No No 002 0S0a2m pSlaemple E -Et- t No No NumbNeurm boefr IoDfs IDs 1 1 V -Vt- t No No ID 1ID 1 VineVgianregar dV/dtV/-dtt- t No No EntrEyn ttryp etype WeigWhetight T –Tt– t No No LoweLro wleirm ilti m[igt] [g] 0.70.7 E –EV –& Vd E&/ dVE /–dVV – V No No UppeUrp pleirm ilti m[igt] [g] 1.01.0 V –Vt –& td V&/ dtV /–dtt – t No No DensDietnys i[tgy/ m[Lg]/mL] 1.01.0 MethMoedthod No No CorrCeocrtrieocnt ifoanc tfoarctor 1.01.0 SeriSesr ideast adata No No TempTermapteurraet u[r°eC ][°C] 25.025.0 CondCiotnidointion No No EntrEyntry ArbiAtrrbairtyrary 008 0E0n8d Eonfd soafm pslaemple 003 0T0i3t rTaitiroant isotna nsdt a(nRdo n(dRolnidnool iTnToL )T TL) TypeType RondRolnidnool iTnToL TTL TitrTaitiroant isotna nsdtand RondRolnidnool iTnToL T1TL 1 004 0S0t4i rStir SpeeSdp e[e%d] [%] 35 35 DuraDtuiroant i[osn] [s] 10 10 005 0T0i5t rTaitiroant i(oEnQ P()E Q[P1)] [1] TitrTainttrant TitrTainttrant NaOHNaOH ConcCeontcreantiroant i[omno l[/mLo]l/L] 0.10.1 SensSoernsor TypeType pH pH SensSoernsor DG11D5G-1S1C5-SC UnitUnit pH pH TempTermapteurraet uarceq uaicsqiutiisointion TempTermapteurraet uarceq uaicsqiutiisointionNo No StirStir SpeeSdp e[e%d] [%] 35 35 PredPirsepdeinsspense ModeMode VoluVmoelume VoluVmoel u[mmeL ][mL] 1.01.0 WaitW atiitm et i[mse] [s] 5 5 ContCroonltrol ContCroonltrol UserUser TitrTainttr aandtd iatdidointion DynaDmyincamic dE (dsEe t( sveatl uvea)l u[em)V ][mV] 12.012.0 dV (dmVi n()m i[nm)L ][mL] 0.005.005 dV (dmVa x()m a[xm)L ][mL] 0.50.5 ModeMode EquiElqiubirliubmr icuomn tcroonltlreodlled dE [dmEV ][mV] 0.50.5 dt [dst] [s] 1 1 t (mti n()m i[ns)] [s] 3 3 t (mta x()m a[xs)] [s] 30 30 EvalEuvatliuoant iaond arnedc orgenciotginointion ProcPerdoucreedure StanSdtarndard ThreTshhroelsdh o[lpdH /[mpLH]/mL] 5 5 TendTencdyency PosiPtoisvietive RangReasnges 0 0 Add.A dEdQ.P EcQrPi tcerriitaeria No No TermTienramtiinoantion At VAmta xV m[amxL ][mL] 20.020.0 At pAott epnotieanltial No No At sAlto pselope No No AfteArf tneurm bneurm boefr of recorgenciozgendi zEeQdP sEQPs YesYes NumbNeurm boefr EoQfP sEQPs 1 1 CombCionmebdi nteedr mtienramtiinoantion critcerriitaeria No No 006 0C0a6l cCualactuiloant iRo1n R1 ResuRlets utlytp etype PredPerfeidneefdined CalcCualactuiloant itoynp etype DireDcitr etcitt rtaitiroantion ResuRletsult ContCeontent ResuRlets uulnti tunit % % FormFuolramula R1=QR*1C=/Qm*C/m SeleScetledc tEeQdP EQP 1 1 ConsCtoannstant C=M/C(=1M0/*(z1)0*z) M M M[AcMe[tAicce taici da]cid] z z z[Acze[tAicce taici da]cid] DeciDmeacli mpala cpelsaces 3 3 ResuRlets ulitm iltismits No No RecoRredc osrtda tsitsaticsstics YesYes MEMTTELTETRLE TRO TLEODLEODO PagPea g6eo f6 6of 6 TitrTaittiroant iAonp pAlipcpaltiicoantioMn40M04-020-029009 METTLER TOLEDO Page 6 of 6 Titration Application M400-2009

METTLER TOLEDO 　　　　　　　　　　　 Application M402-2006 食油中の遊離脂肪酸の定量 食油の遊離脂肪酸（FFA）の定量　－　エタノールとジエチルエーテルが 1対 1（V/V）の溶 媒にサンプルを溶解し、エタノール水酸化カリウムを滴定液とした電位差滴定法 サンプル オリーブ油　2-4g サンプル前処理と測定方法 対象物質 mgKOH/gサンプルとしての 注意： 遊離脂肪酸量 本メソッドは、サンプルチェンジャーと分 分子量（M）56.1g/mol,　 注ユニット追加で全自動設定が可能です。 z（当量数） = 1 マニュアル設定にも簡単に変更できます。 装置の滴定スタンドメニューでマニュアル 試薬 60mlエタノール：ジエチル スタンドを選定して下さい。 エーテル　1対 1（v/v） 1）水酸化カリウムの力価は安息香酸 25mg 　 を 60ml溶媒に溶解して求める。ガラス 滴定液 エタノール水酸化カリウム　 　 ビーカーを使用する。少量のサンプリン KOH 　 グなので計量には最小計量 0.1mg以下の　 天びんを用いる。安息香酸は腐食性が強 濃度 = 0.02mol/L 　 いので皮膚や目を保護する事。 標準物質 フタル酸水素カリウム、25mg 2）ブランク値は溶媒のバッチ毎に測定する。 　（ アプリケーション M403） センサ DG113-SC 　 B[Solvent FFA]として保存される。 3）2-4gのオリーブ油を滴定ビーカーにサ 　 ンプリングする。 化学反応 R-COOH + KOH → 4）60mlの溶媒を追加した分注ユニット R-COO- + K+ + H O 　 （ 20mlビュレット）で溶解度を上げる為2 R-COOH: 遊離脂肪酸（FFA） 　 に 2回に別けて添加する。 5）毎測定後、DG113-SC電極はサンプルチェ 　 ンジャーロンドリーノのダイヤフラムポ 計算式 酸価（mg KOH/g） 　 ンプを使用して洗浄する。 　（ロンドリーノ設定：ポジション１） R1=(Q-B[FFA])*C/m, C=M, z=1 注意点 オリーブ油中のFFA (g FFA/100g) R2=(Q-B[FFA])*C/m, 1）本メソッドはオリーブ油に最適な条件に 　 設定されています。サンプルに応じて条 C=M*0.1, z=1 　 件を変更する必要があります。 M[Oleic acid] = 282.47 g/mol 2）溶媒で脱水した DG113電極を回復させ 　 るために一晩水に漬けておきます。測定 　 前に、電極を溶媒で洗浄します。 廃棄処理 中和し、有機溶媒として廃棄 3）サンプルによっては終点が見難く、ノイ する 　 ズが影響する場合があります。改善する 　 には 1Lの溶媒に 0.05mol/Lの安息香酸 作者 Melanie Nijman, 　 を 1ml添加します。同様の処理は、ブラ MSG Anachem, July 2006 　 ンクを求める時に滴定液の消費量が微量 　 な場合にも有効です。 METTLER TOLEDO Page 1 of 4 Titration Application M402-2006

測定装置 - 自動滴定装置 T50/T70/T90、コンパクト滴定装置 G20 Instruments - XS- 2T0505/ T天70び/T9ん0 Titration Excellence, G20 Compact Titrator (with small changes). - サ-ンXSプ20ル5 チBaェlanンceジャーロンドリーノ（ダイヤフラムポンプと洗浄ユニット追加） - Rondolino Sample Changer with diaphragm pump and PowerShower™ アクセサリ - ガラスビュレット 10ml DV1010と 20ml DV1020 Accessories- 分-注10ユ mニL DッV1ト010 and 20 mL DV1020 glass burettes- 1 additional D osing Unit - ガ-ラGlスas滴s ti定traビtionー beカakーer　 MEM-1E0-140416446 - Olivetti Printer JobJet 210 Results Results 　　Al　l results Method-ID M402 Sample Edible oil (1/1) R1 (Content) 0.846807 mg KOH/g R2 (Content) 0.426301 g/100g Sample Edible oil (1/2) R1 (Content) 0.845652 mg KOH/g R2 (Content) 0.425720 g/100g Sample Edible oil (1/3) R1 (Content) 0.847853 mg KOH/g R2 (Content) 0.426828 g/100g Sample Edible oil (1/4) R1 (Content) 0.847045 mg KOH/g R2 (Content) 0.426421 g/100g Sample Edible oil (1/5) R1 (Content) 0.847805 mg KOH/g R2 (Content) 0.426804 g/100g Sample Edible oil (1/6) R1 (Content) 0.842935 mg KOH/g R2 (Content) 0.424352 g/100g Statistics Method-ID M402 R1 Content Samples 6 Mean 0.846350 mg KOH/g s 0.001856 mg KOH/g srel 0.219 % R2 Oleic acid content Samples 6 Mean 0.426071 g/100g s 0.000934 g/100g srel 0.219 % Titration curve Titration curve METTLER TOLEDO Page 2 of 4 Titration Application M402-2006 METTLER TOLEDO Page 2 of 4 Titration Application M402-2006

Table of measured values 　　　 コメント ・酸価は酵素リパーゼによる食油と油脂の分解を示します。この分解は温度と光により加速 　します。油の酸化の原因は分解とそれに伴う遊離脂肪酸の生成です。 ・遊離脂肪酸の量は、100gサンプル中のオレイン酸量として定義されています。油の種類 　によってはラウリン酸またはパルミチン酸として提示されます。 ・Literature: “Edible Oil and Fat”, METTLER TOLEDO Titration Applications Brochure No. 24, 　ME-51 725 054. METTLER TOLEDO Page 3 of 4 Titration Application M402-2006

Method Method 001 Title After number of Type General titration recognized EQPs Yes Compatible with T50 / T70 / T90 Number of EQPs 1 ID M402 Combined termination Title Free fatty acid content criteria No Author METTLER TOLEDO Date/Time 02.08.2006 15:00:00 009 Calculation R1 Modified at -- Result Content Modified by -- Result unit mg KOH/g Protect No Formula R1=(Q-B[Solvent FFA]*C/m SOP None Constant C=M/z M M[Potassium hydroxide] 002 Sample z z[Potassium hydroxide] Number of IDs 1 Decimal places 6 ID 1 Edible oil Result limits No Entry type Weight Record statistics No Lower limit 0.0 g Extra statistical func. No Upper limit 5.0 g Send to buffer No Density 1.0 g/mL Condition No Correction factor 1.0 Temperature 25.0°C 010 Calculation R2 Entry Arbitrary Result Oleic acid content Result unit g/100g 003 Titration stand (Rondolino TTL) Formula R2=(Q-B[Solvent FFA])*C/m Type Rondolino TTL Constant C=M/(10*z) Titration stand Rondolino TTL 1 M M[Oleic acid] Z z[Oleic acid] 004 Dispense (normal)[1] Decimal places 6 Titrant Solvent FFA Result limits No Concentration 1 Add. statistics Volume 20.0 mL functionalities No Dosing rate 60.0 mL/min Condition No 011 Record Results Per series 005 Stir Raw results Per series Speed 35% Table of meas. values Last titration function Duration 10 s Sample data Per series Condition No Resource data No E - V Last titration function 006 Dispense (normal)[2] dE/dV - V Last titration function Titrant Solvent FFA ... Concentration 1 Volume 40.0 mL 012 End of sample Dosing rate 60.0 mL/min Condition No ------------------------------------------------------------- 007 Stir G20 Compact Titrator Method: Speed 35% Duration 10 s The G20 method includes slightly modifications: Condition No ... 004 Dispense (normal)[1] 008 Titration (EQP) [1] Titrant Solvent FFA Titrant Concentration 1 Titrant KOH in EtOH Volume 60.0 mL Concentration 0.02 mol/L Dosing rate 60.0 mL/min Sensor Condition No Type pH (The G20 has only one Sensor DG113-SC dispense function available) Unit mV ... Temperature acquisition 009 Calculation R1 Temperature acquisition No Result type Predefined Stir Calculation type Blank comp. Speed 35% Formula R1=(Q-B[Blank])*C/m Predispense Selected EQP 1 Mode Volume Result Content Volume 1.0 mL Result unit mg/g Wait time 0 s Constant C M/z Control M M[Potassium hydroxide] Control User z z[Potassium hydroxide] Titrant addition Dynamic Decimal places 4 dE (set value) 12.0 mV Result limits No dV (min) 0.01 mL Record statistics Yes dV (max) 0.3 mL Meas. Val. acquisition Equilibrium controlled 010 Calculation R2 dE 1.0 mV Result type Predefined dt 2 s Calculation type Blank comp. t(min) 2 s Formula R1=(Q-B[Blank])*C/m t(max) 15 s Selected EQP 1 Evaluation and recognition Result Content Procedure Standard Result unit g/100g Threshold 20 mV/mL Constant C M/(10*z) Tendency Negative M M[Oleic acid] Ranges 0 z z[Oleic acid] Add. EQP criteria No Decimal places 4 Termination Result limits No At Vmax 10.0 mL Record statistics Yes At potential No At slope No METTLER TOLEDO Page 4 of 4 Titration Application M402-2006 METTLER TOLEDO Page 4 of 4 Titration Application M402-2006

METTLER TOLEDO 　　　　　　　　　　　 Application M403-2006 遊離脂肪酸（FFA）溶媒のブランク値 遊離脂肪酸測定で使用するエタノール：ジエチルエーテル 1：1（V/V）溶剤のブランク値を 求める。 サンプル 60ml サンプル前処理と測定方法 エタノール：ジエチルエーテ ル 1：1（V/V） 注意： 本メソッドは、サンプルチェンジャーと分 注ユニット追加で全自動設定が可能です。 対象物質 酸性物質、 マニュアル設定にも簡単に変更できます。 装置の滴定スタンドメニューでマニュアル ｚ（当量数）＝ 1 スタンドを選定して下さい。 1）力価測定には安息香酸 25mgを溶剤 試薬 　 60mlに溶解する。サンプリング量が少-- 　 量なので、天びんは分解能が 0.1mg以下 滴定液 エタノール水酸化カリウム　 　 を準備する。　 注意：安息香酸は腐食性があります。 KOH 　 使用時には皮膚や目を保護して下さい。 濃度 = 0.02mol/L 2）溶媒（エタノール：ジエチルエーテル） 　 調整毎にブランク値を測定する。 　B[Solvent FFA]として保管する。 標準物質 フタル酸水素カリウム、25mg 3）60ml溶媒は、20mlビュレットと分注ユ 　 ニットで自動的に添加可能。またはピペッ 　 トにて手動で添加する。 センサ DG113-SC 4）毎測定後、DG113-SC電極はサンプルチェ 　 ンジャーロンドリーノのダイヤフラムポ 　ンプを使用して洗浄する。 化学反応 R-COOH + KOH → 　 （ ロンドリーノ設定：ポジション１） R-COO- + K+ + H2O R-COOH: 遊離脂肪酸 注意点 1）本メソッドは溶媒ブランク測定に最適な 計算式 ブランク値 　条件に設定されています。サンプルに応 　 じて条件を変更する必要があります。 R1=Q, mmol 2）溶媒で脱水した DG113電極を回復させ 　 るために一晩水に漬けておきます。 廃棄処理 中和し、有機溶媒として廃棄 　 測定前に、電極を溶媒で洗浄します。 する 3）必要に応じて 1Lの溶媒に 0.05mol/Lの　 安息香酸を 1ml添加します。終点の電位 　変化が見極めやすくなります。 作者 Melanie Nijman, MSG Anachem, July 2006 METTLER TOLEDO Page 1 of 4 Titration Application M403-2006

測定装置 - 自動滴定装置 T50/T70/T90、コンパクト滴定装置 G20 - XS205 天びん Instruments - T50/T70/T90 Titration Excellence, G20 Compact Titrator (with small changes). - サ-ンXSプ20ル5 チBaェlanンceジャーロンドリーノ（ダイヤフラムポンプと洗浄ユニット追加） - Rondolino Sample Changer with diaphragm pump and PowerShower™ アクセサリ - ガラスビュレット 10ml DV1010と 20ml DV1020 Accessories- 分-注10ユ mニL DッV1ト01 0 and 20 mL DV1020 glass burettes ガ-ラ1スadd滴itio定naビl Dosing Unit- - Glass titrationー bカeakーer　 MEM-1E0-1140416446 - Olivetti Printer JobJet 210 Results Results All results Method-ID M403 Sample Solvent FFA (1/1) R1 (Content) 0.002486 mmol Sample Solvent FFA (1/2) R1 (Content) 0.002612 mmol Sample Solvent FFA (1/3) R1 (Content) 0.002697 mmol Sample Solvent FFA (1/4) R1 (Content) 0.002573 mmol Sample Solvent FFA (1/5) R1 (Content) 0.002638 mmol Sample Solvent FFA (1/6) R1 (Content) 0.002543 mmol Sample Solvent FFA (1/6) R1 (Content) 0.002543 mmol Statistics Method-ID M403 R1 Consumption Samples 7 Mean 0.002592 mmol s 0.000068 mmol srel 2.615 % Titration curve Titration curve METTLER TOLEDO Page 2 of 4 Titration Application M403-2006 METTLER TOLEDO Page 2 of 4 Titration Application M403-2006

Table of measured values 　　　 コメント ・酸価は酵素リパーゼによる食油と油脂の分解を示します。この分解は温度と光により加速 　します。油の酸化の原因は分解とそれに伴う遊離脂肪酸の生成です。 ・遊離脂肪酸の量は、100gサンプル中のオレイン酸量として定義されています。油の種類 　によってはラウリン酸またはパルミチン酸として提示されます。 ・Literature: “Edible Oil and Fat”, METTLER TOLEDO Titration Applications Brochure No. 24, 　ME-51 725 054. METTLER TOLEDO Page 3 of 4 Titration Application M403-2006

Method Method 001 Title Record statistics Yes Type General titration Extra statistical func. No Compatible with T50 / T70 / T90 Send to buffer No ID M403 Condition No Title Blank solvent FFA Author METTLER TOLEDO 008 Record Date/Time 02.08.2006 15:00:00 Results Per series Modified at -- Raw results Per series Modified by -- Table of meas. values Last titration function Protect No Sample data Per series SOP None Resource data No E - V Last titration function 002 Sample dE/dV - V Last titration function Number of IDs 1 ... ID 1 Solvent FFA Entry type Fixed volume 009 End of sample Volume 60 mL Density 1.0 g/mL 010 Blank Correction factor 1.0 Name Solvent FFA Temperature 25.0°C Value B=Mean[R1] Units mmol 003 Titration stand (Rondolino TTL) Limits No Type Rondolino TTL Titration stand Rondolino TTL 1 011 Calculation R2 Result Blank solvent FFA 004 Dispense (normal)[1] Result unit mmol Titrant Solvent FFA Formula R2=Mean[R1] Concentration 1 Constant C=1 Volume 60.0 mL M M[None] Dosing rate 60.0 mL/min z z[None] Condition No Decimal places 6 Result limits No 005 Stir Record statistics Yes Speed 35% Extra statistical func. No Duration 60 s Send to buffer No Condition No Condition No 006 Titration (EQP) [1] 012 Record Titrant Results Yes Titrant KOH in EtOH Raw results No Concentration 0.02 mol/L Resource data No Sensor Calibration curve No Type pH Method No Sensor DG113-SC Series data No Unit mV Temperature acquisition Temperature acquisition No Stir ------------------------------------------------------------- Speed 35% Predispense Mode None Wait time 0 s Control Control User G20 Compact Titrator Method: Titrant addition Dynamic dE (set value) 8.0 mV The G20 method includes slightly modifications: dV (min) 0.005 mL ... dV (max) 0.03 mL 007 Calculation R1 Meas. Val. acquisition Equilibrium controlled Result type Predefined dE 1.0 mV Calculation type Direct titration dt 1 s Formula R1=Q t(min) 3 s Selected EQP 1 t(max) 30 s Result Consumption Evaluation and recognition Result unit mmol Procedure Standard Constant C 1 Threshold 20 mV/mL M M[None] Tendency Negative z z[None] Ranges 0 Decimal places 6 Add. EQP criteria No Result limits No Termination Record statistics Yes At Vmax 10.0 mL ... At potential No 011 Calculation R2 At slope No Result type Predefined After number of Formula R2=Mean[R1] recognized EQPs Yes Result Mean Number of EQPs 1 Result unit -- Combined termination Constant C 1 criteria No Decimal places 5 Result limits No 007 Calculation R1 Record statistics Yes Result Consumption Result unit mmol Formula R1=Q Constant C=1 M M[None] z z[None] Decimal places 6 Result limits No METTLER TOLEDO Page 4 of 4 Titration Application M403-2006 METTLER TOLEDO Page 4 of 4 Titration Application M403-2006