腸管出血性大腸菌（EHEC）リアルタイムPCR検査システム

腸管出血性大腸菌（EHEC） リアルタイムPCR検査システム タカラバイオの検査システムが、厚生労働省通知に収載されました 遺伝子検出法によるスクリーニング ベロ毒素（VT）遺伝子検出 培養液 ベロ毒素（VT）遺伝子もインターナルコントロールも DNA抽出 1チューブで判定 CycleavePCR® O-157（VT gene） VT遺伝子検査 Screening Kit Ver.2.0 陰性 終了 インターナルコントロールによる 陽性 偽陰性チェックが必須に！ O抗原遺伝子検査 O抗原型遺伝子タイピング 陰性 終了 陽性 O抗原型 O157、O26、O111、O121、O103、O145 のタイピングに 分離培養法 CycleavePCR® EHEC 結果判定 O抗原型Typing Kit シリーズ 「腸管出血性大腸菌O26、O103、O111、O121、O145及びO157 の検査法について」 厚生労働省医薬食品局食品安全部監視安 全課長通知（食安監発1120第1号）より引用 ● 検査フロー ● 1. 検体と試薬の準備 2. 装置にセットし、検査開始 3. 結果判定 総合判定 Posi ： 陽性 Nega ： 陰性 ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp

◆ベロ毒素（VT）遺伝子検出 ◆ DNA抽出 遺伝子検出法によるスクリーニング 培養液 ・アルカリ熱抽出法 通知法収載 ・カラム精製法 DNA抽出 － DNeasy Blood & Tissue Kit （QIAGEN社） 通知法収載 VT遺伝子検査 － NucleoSpin® Tissue （製品コード 740952.10/.50/.250） 食品の増菌培養液からの精製に！ 陰性 終了 － NucleoSpin® Food （製品コード 740945.10/.50/.250） 陽性 チョコレートなど、抽出が困難な食品からの精製に！ NucleoSpin各種はマッハライ・ナーゲル社の製品です。 O抗原遺伝子検査 VT遺伝子検出 CycleavePCR® O-157 (VT gene) Screening Kit Ver.2.0 （製品コード CY217A/B） 通知法収載 ＜キットの内容＞ リアルタイムPCR試薬 ● 1チューブでインターナルコントロールによる偽陰性チェックが可能！ 1. 2×Cycleave Reaction Mixture 2. VT Primer/Probe Mix (FAM、ROX) 3. dH2O 反応測定イメージ VT遺伝子 IC アルカリ熱抽出試薬 4. NaOH Solution (50 mM) （FAM） （ROX） 5. Tris-HCl Buffer pH7.0 (1 M) 6. dH2O (for Dilution) Positive Control DNA （陽性コントロール） ●抽出試薬も含んだオールインワンキット 7. VT1 Positive Control ●プレミックス試薬なので、初心者でもかんたん 8. VT2 Positive Control ● FAMとROXを検出できる幅広いqPCR装置で使用可能 1チューブ ＜インターナルコントロール（IC）による偽陰性チェック＞ でOK！ VT遺伝子 IC VT遺伝子 IC （FAM） （ROX） （FAM） （ROX） 反応阻害なし 反応阻害あり VT陰性 判定不能 リアルタイムPCR装置 はじめての方にも使いやすい日本語ソフトウェアを搭載→ Thermal Cycler Dice® Real Time Systemシリーズ II （製品コード TP900） III with PC （製品コード TP970） Lite （製品コード TP700） ・96 wellタイプ、0.2 mlチューブ対応 ・96 wellタイプ、0.1 mlチューブ対応 ・48 wellタイプ、0.2 mlチューブ対応 通知法収載 TP900と同等の反応性を示すことを確認 - 2 - ｜ EHEC_qPCR検査システム

◆ O抗原型遺伝子タイピング ◆ DNA抽出 遺伝子検出法によるスクリーニング VT遺伝子検査 ・アルカリ熱抽出法 陰性 終了 ・カラム精製法 陽性 － DNeasy Blood & Tissue Kit （QIAGEN社） 通知法収載 － NucleoSpin® Tissue （製品コード 740952.10/.50/.250） O抗原遺伝子検査 食品の増菌培養液からの精製に！ 陰性 終了 － NucleoSpin® Food （製品コード 740945.10/.50/.250） チョコレートなど、抽出が困難な食品からの精製に！ 陽性 NucleoSpin各種はマッハライ・ナーゲル社の製品です。 分離培養法 O抗原型遺伝子タイピング CycleavePCR® EHEC (O157/O26) Typing Kit （製品コード CY237） 通知法収載 CycleavePCR® EHEC (O111/O121) Typing Kit （製品コード CY238） 通知法収載 CycleavePCR® EHEC (O103/O145) Typing Kit （製品コード CY239） 通知法収載 CycleavePCR® EHEC (O165) Typing Kit （製品コード CY241） ●主要な7血清型をタイピングできる試薬キットをラインナップ ＜キットの内容＞ ●プレミックス試薬なので、初心者でもかんたん 例） CycleavePCR EHEC (O157/O26) Typing Kit ● FAMとROXを検出できる幅広いqPCR装置で使用可能 リアルタイムPCR試薬 1. 2×Cycleave Reaction Mixture 例） CycleavePCR® EHEC (O157/O26) Typing Kit 2. O157/O26 Primer/Probe Mix 3. dH2O Positive Control DNA （陽性コントロール） O157 O26 4. O157 Positive Control （FAM） （ROX） 5. O26 Positive Control 6. EASY Dilution (for Real Time PCR) O157 O26 （FAM） （ROX） 陽性 陰性 各試薬のチューブ には判別しやすい カラーキャップを 採用！ ●食品環境検査用ソフトウェア（日本語表示）を搭載 ●シングルキャップ付き8連チューブが便利 検査目的での使いやすさを追及した「食品環境検査用ソフトウェア」 を ひとつひとつ蓋を開閉できるシングルキャップ付きの 搭載しています。セットアップから解析までスムーズに操作できる直感 チューブは、コンタミネーション回避に有効です。 性を重視した設計で、初心者の方でも簡単に使用できます。 0.2 ml 8-strip tube, individual Flat Caps （製品コード NJ600） 総合判定 ※ 0.2 mlチューブ対応qPCR装置〔TP900、TP700〕用 ｜ EHEC_qPCR検査システム - 3 -

【参考：エンドポイントPCRによる検出】 VT遺伝子検出 ← IC（685 bp） EHEC (VT gene) PCR Screening Set （製品コード RR120A） 通知法収載 ← VT遺伝子 ● 1 チューブでインターナルコントロール（IC）による偽陰性チェックが可能！ （171 bp） 結果判定イメージ O型抗原遺伝子検出 EHEC (O antigens) PCR Typing Kit （製品コード RR133A） ● O抗原型のうち主要な7血清型をマルチプレックスPCRでタイピング （O157、O26、O111、O121、O103、O145、O165のタイピングが1チューブで可能） ●ベロ毒素1型、ベロ毒素2型、eae遺伝子も同時に検出 ＊本キットの開発には、宮崎大学農学部畜産草地科学科衛生微生物学分野井口純准教授にご協力頂きました。 結果判定イメージ PCR装置 TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice® Touch （製品コード TP350） ● A4サイズに収まるハイパフォーマンスな96ウェルタイプのPCR装置 【製品一覧】 表示価格はすべて税別です。 製 品 名 容 量 製品コード 価 格 通知法収載 ベロ毒素（VT遺伝子）スクリーニング 50回 CY217A ¥52,000 CycleavePCR® O-157(VT gene) Screening Kit Ver.2.0 ● 100回 CY217B ¥96,000 EHEC (VT gene) PCR Screening Set 200回 RR120A ¥69,000 ● ベロ毒素（VT1/ VT2）遺伝子タイピング CycleavePCR® O-157(VT1/VT2) Typing Kit VT1、VT2 各25回 CY222 ¥69,000 O-157（ベロ毒素1型、2型遺伝子） PCR Typing Set 100回 RR105A ¥69,000 ● O抗原型遺伝子タイピング CycleavePCR® EHEC(O157/O26) Typing Kit 20回 CY237 ¥28,000 ● CycleavePCR® EHEC(O111/O121) Typing Kit 20回 CY238 ¥28,000 ● CycleavePCR® EHEC(O103/O145) Typing Kit 20回 CY239 ¥28,000 ● CycleavePCR® EHEC(O165) Typing Kit 50回 CY241 ¥69,000 EHEC (O antigens) PCR Typing Kit 50回 RR133A ¥77,000 リアルタイムPCR装置 / PCR装置 Thermal Cycler Dice® Real Time System II 一式 TP900 ¥4,125,000 ● Thermal Cycler Dice® Real Time System III with PC 一式 TP970 ¥3,500,000 Thermal Cycler Dice® Real Time System Lite 一式 TP700 ¥2,530,000 TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice® Touch 一台 TP350 ¥580,000 ゲノムDNA調製 ゲノムDNA調製 10回 740952.10 ¥6,900 10回 740945.10 ¥7,400 NucleoSpin® Tissue 50回 740952.50 ¥23,000 NucleoSpin® Food 50回 740945.50 ¥23,000 250回 740952.250 ¥103,000 250回 740945.250 ¥100,000 リアルタイムPCRサポートライン好評開設中！ 専用URL：http://www.takara-bio.co.jp/realtime_sl/ リアルタイムPCR検査に関する素朴な疑問から高度なご質問まで、専門スタッフが丁寧にお答えします。 ●訪問式のセミナー、デモンストレーションを随時実施中です！お気軽にお問合せ下さい。 ・本パンフレットで紹介した製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品 等として使用しないでください。 ・タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。 ・本パンフレットに記載された社名および製品名は、特に記載がなくても各社の商標または登録商標です。 ・ライセンス情報については弊社ウェブサイトにてご確認ください。 ・本パンフレット記載の価格は2017年4月1日現在の希望小売価格です。価格に消費税は含まれておりません。 2017年4月作成G 取扱店 東京支店 TEL 03-3271-8553 FAX 03-3271-7282 関西支店 TEL 077-565-6969 FAX 077-565-6995 テクニカルサポートライン TEL 077-565-6999 FAX 077-565-6995 ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp Facebook http://www.facebook.com/takarabio.jp